酶聯(lián)免疫試劑盒標(biāo)本的采取
ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液（如血清）,分泌物（唾液）和排泄物（如尿液,糞便）等。均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原 成份.有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如血清,尿液）,有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）.大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本 .血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清.制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固,血塊收縮后即可取得.除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本.在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用.血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色.
酶聯(lián)免疫試劑盒標(biāo)本的保存
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè).如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng).如在冰箱中保存過(guò)久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深.一般說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存.凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩.混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,澄清后再檢測(cè).反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存.保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無(wú)菌操作,也可加入適當(dāng)防腐劑.
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