ELISA實(shí)驗(yàn)過程中操作步驟繁多復(fù)雜，其中洗滌雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。這一步驟不容小視哦，上海通蔚在此分享洗滌的方法。
ELSIA 就是靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，而在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。
(1)浸泡式
a.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液；
b.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后，即甩去)；
c.浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1-2 分鐘，間歇搖動(dòng)，浸泡時(shí)間不可隨意縮短；
d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干；
e.重復(fù)操作c 和d，洗滌3-4次(或按說明規(guī)定)。
(2)流水沖洗式
流水沖洗法zui初用于小珠載體的洗滌，洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時(shí)附接一特殊裝置，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗，持續(xù)沖洗 2 分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2 分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖洗式則好比淋浴，其洗滌效果更為*，且也簡(jiǎn)便、快速。
已有實(shí)驗(yàn)表明，流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗滌效果更佳。
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